BMCRM e00289 Таблица 1.

Таблица 1. Деградация в условиях in vitro матриксов на основе коллагена и гиалуроновой кислоты

Основной компонент

Конц. осн. комп-та

Модифицирующие компоненты

Условия модификации

Раствор для деградации

Время, дней

t ºС

Ссылка

Коллаген тип I (бычий, «Sigma Aldrich», США)

2 мг/мл

Сшивающий агент – PEG-DA (20 кДа, «Sigma Aldrich», США) 10% масс.

Фотоинициатор («Sigma Aldrich», США) 0.1% масс.

Коллагеновый гидрогель смешивали с раствором PEG-DA и фотоинициатора и сшивали под воздействием УФ-излучения (365 нм, 5 минут).

Среда RPMI-1640 с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки, 2 ммоль/л глутамина и 1% антибиотиков

8

37

[11, 24]

Коллаген тип I (из бычьих сухожилий, «Integra LifeSciences», США)

6 мг/мл

Гиалуроновая кислота (Streptococcus zooepidermicus; «Sigma Chemical», США) 10 мг/мл (1% масс.)

Сшивающий агент – 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (EDAC, «Sigma Chemical»)

Расчетные количества компонентов смешивали и лиофилизировали при -40ºС. Химическое сшивание матриксов проводили при комнатной температуре с использованием карбодиимида.

Культуральная среда с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки, и 1% пенициллина

21

37

[12]

Коллаген тип I (лошадиный, «Euroresearch», Италия)

губка

Тетрабутиламмониевая соль гиалуроновой кислоты

1) Лиофилизировали губку, смоченную в водном растворе 1% масс. HA-TBA.

2) Непрерывно кипятили с обратным холодильником в течение 8 ч с использованием ацетона.

Раствор коллагеназы из Clostridium hystolyticum (0,0004% масс.) в

трис-HCl (pH 7.4)

3

37

[9]

Коллаген тип I (бычий, «Advanced Biomatrix», США)

5 мг/мл

Фотоинициатор – рибофлавин-5'-фосфат гидрат натрия («Sigma Aldrich», США) 0.25 ммоль/л

К раствору коллагена добавляли фотоинициатор и отверждали под воздействием УФ-излучения (365 нм, 1,8 мВт/см², 10 мин, 15 мин и 30 мин).

Раствор коллагеназы из Clostridium тип I (0.4% масс.) в среде KSFM

6

25

[13]

Коммерческая коллагеновая губка («Lando Biomaterials», Китай)

губка

Сшивающий агент – метакрилоил поликапролактон (3200 Да, «Engineering For Life», Китай)

Фотоинициатор – 2,4,6-триметилбензоилдифенилфосфинат (TPO, «Engineering For Life») 0.5% масс.

Губку пропитывали раствором ТРО в PCLМА и сшивали под воздействием УФ-излучения (405 нм).

Раствор коллагеназы (0.01% масс.) в PBS

(pH 7.4)

28

25

[10]

Метакрилированная гиалуроновая кислота (250 кДа, «Bioiberica», Испания)

1% масс.

Фотоинициатор – Irgacure 2959 («Sigma Aldrich», США) 1% масс.

Раствор Irgacure 2959 в HAMA наносили на пористые матриксы, состоящие из поли(D, L-лактид-ко-гликолида) и PEG-DA, и отверждали с помощью фотореактора, оснащенного пятью УФ-лампами (313 нм, 0.095 мВт/см², 5 ми).

PBS (pH 7.4).

10

37

[21]

Метакрилированная гиалуроновая кислота (100 кДа, «LifeCore Biomedical», США)

5% масс.

Гиалуроновая кислота, модифицированная галловой кислотой 5% масс.

Фотоинициатор – Irgacure 2959 («Merck», Германия) 0.5% масс.

В HAMA добавляли Irgacure 2959 и смешивали с HAGA в соотношении 1:1. Смесь отверждали под воздействием УФ-излучения (365 нм, 25 мВт/см², 2 мин).

Раствор гиалуронидазы (50 МЕ/мл) в DPBS (pH 7.4).

7

37

[23]

Метакрилированная гиалуроновая кислота (80 – 100 кДа, «Biosynth», США)

1%, 3%, 5% масс.

Метакрилированный желатин (тип B из бычий кожи, «Sigma Aldrich», США) 2%, 6%, 10% масс.

Фотоинициатор – Irgacure 2959 («Sigma Aldrich», США) 0,5% масс.

HAMA (СМ = 11%), GelMA (СМ = 40%) смешивали с Irgacure 2959 и отверждали УФ-излучением (365 нм, 4 Вт/см², 10 мин).

Раствор коллагеназы тип II (0.001% масс.) в PBS (pH = 7.4).

1

37

[19]

Метакрилированная гиалуроновая кислота (2000 кДа, «Kikkoman», Япония)

1% масс.

Метакрилированный желатин (тип B из свиной кожи, «Sigma Aldrich», США) 10% масс.

Сшивающий агент – 3-акрилоксипропилсилантриол функционализированный нанокремнеземом 0.1 – 1% масс.

Фотоинициатор – фенил-2,4,6-триметилбензоилфосфинат лития (LAP, «Sigma Aldrich»,США) 0.3% масс.

HAMA (СМ = 85 ± 10%), GelMA (СМ = 95 ± 5%) в соотношении 2:1 и сшивающий агент смешивали с LAP. Сшивание проводили с использованием фотореактора с УФ-излучением (280 – 400 нм, 2 мин).

Раствор гиалуронидазы (2.5 МЕ/мл) в PBS (pH 7.4).

30

37

[20]

Тиолированная гиалуроновая кислота (400 кДа, «Blafar», Ирландия)

4% масс.

Гиперразветвленный PEG-DA (10 – 20 кДа, «Sigma Aldrich», Великобритания) 40% масс.

Растворы компонентов в PBS смешивали в соотношении 1:1. Гидрогель образовался в результате реакции акрилатных групп ПЭГ-ДА с тиоловыми группами гиалуроновой кислоты по реакции присоединения Михаэля.

PBS (pH 7.4).

64

37

[22]

Акрилированная гиалуроновая кислота (10 кДа и 50 кДа, «Lifecore Biomedical», США)

0,3 моль/л

Сшивающий агент – полиэтиленгликоль-тетратиол

(10 кДа, «Sun Bio», США)

0.03 моль/л

Гелеобразование акрилированной гиалуроновой кислоты и PEG-SH₄ происходило в результате реакции Михаэля при температуре 37°C.

PBS (pH = 7.4).

45

37

[17]

Раствор гиалуронидазы (100 МЕ/мл) в PBS (pH 7.4).

45

37

Примечания. Среда RPMI-1640 – растворённая в очищенной воде смесь неорганических солей, аминокислот, витаминов, глюкозы и фенолового красного, простерилизованная методом мембранной фильтрации (рН от 7.0 до 7.4). HA-TBA – тетрабутиламмониевая соль гиалуроновой кислоты. PCLМА – метакрилоилполикапролактон. PBS – фосфатно-солевой буферный раствор. HAMA – метакрилированная гиалуроновая кислота. HAGA – гиалуроновая кислота, модифицированная галловой кислотой. PEG-SH₄ – полиэтиленгликоль-тетратиол. DPBS – фосфатно-солевой буферный раствор Дульбекко. GelMA – мета

Основной компонент	Конц. осн. комп-та	Модифицирующие компоненты	Условия модификации	Раствор для деградации	Время, дней	t ºС	Ссылка
Коллаген тип I (бычий, «Sigma Aldrich», США)	2 мг/мл	Сшивающий агент – PEG-DA (20 кДа, «Sigma Aldrich», США) 10% масс. Фотоинициатор («Sigma Aldrich», США) 0.1% масс.	Коллагеновый гидрогель смешивали с раствором PEG-DA и фотоинициатора и сшивали под воздействием УФ-излучения (365 нм, 5 минут).	Среда RPMI-1640 с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки, 2 ммоль/л глутамина и 1% антибиотиков	8	37	[11, 24]
Коллаген тип I (из бычьих сухожилий, «Integra LifeSciences», США)	6 мг/мл	Гиалуроновая кислота (Streptococcus zooepidermicus; «Sigma Chemical», США) 10 мг/мл (1% масс.) Сшивающий агент – 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (EDAC, «Sigma Chemical»)	Расчетные количества компонентов смешивали и лиофилизировали при -40ºС. Химическое сшивание матриксов проводили при комнатной температуре с использованием карбодиимида.	Культуральная среда с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки, и 1% пенициллина	21	37	[12]
Коллаген тип I (лошадиный, «Euroresearch», Италия)	губка	Тетрабутиламмониевая соль гиалуроновой кислоты	1) Лиофилизировали губку, смоченную в водном растворе 1% масс. HA-TBA. 2) Непрерывно кипятили с обратным холодильником в течение 8 ч с использованием ацетона.	Раствор коллагеназы из Clostridium hystolyticum (0,0004% масс.) в трис-HCl (pH 7.4)	3	37	[9]
Коллаген тип I (бычий, «Advanced Biomatrix», США)	5 мг/мл	Фотоинициатор – рибофлавин-5'-фосфат гидрат натрия («Sigma Aldrich», США) 0.25 ммоль/л	К раствору коллагена добавляли фотоинициатор и отверждали под воздействием УФ-излучения (365 нм, 1,8 мВт/см², 10 мин, 15 мин и 30 мин).	Раствор коллагеназы из Clostridium тип I (0.4% масс.) в среде KSFM	6	25	[13]
Коммерческая коллагеновая губка («Lando Biomaterials», Китай)	губка	Сшивающий агент – метакрилоил поликапролактон (3200 Да, «Engineering For Life», Китай) Фотоинициатор – 2,4,6-триметилбензоилдифенилфосфинат (TPO, «Engineering For Life») 0.5% масс.	Губку пропитывали раствором ТРО в PCLМА и сшивали под воздействием УФ-излучения (405 нм).	Раствор коллагеназы (0.01% масс.) в PBS (pH 7.4)	28	25	[10]
Метакрилированная гиалуроновая кислота (250 кДа, «Bioiberica», Испания)	1% масс.	Фотоинициатор – Irgacure 2959 («Sigma Aldrich», США) 1% масс.	Раствор Irgacure 2959 в HAMA наносили на пористые матриксы, состоящие из поли(D, L-лактид-ко-гликолида) и PEG-DA, и отверждали с помощью фотореактора, оснащенного пятью УФ-лампами (313 нм, 0.095 мВт/см², 5 ми).	PBS (pH 7.4).	10	37	[21]
Метакрилированная гиалуроновая кислота (100 кДа, «LifeCore Biomedical», США)	5% масс.	Гиалуроновая кислота, модифицированная галловой кислотой 5% масс. Фотоинициатор – Irgacure 2959 («Merck», Германия) 0.5% масс.	В HAMA добавляли Irgacure 2959 и смешивали с HAGA в соотношении 1:1. Смесь отверждали под воздействием УФ-излучения (365 нм, 25 мВт/см², 2 мин).	Раствор гиалуронидазы (50 МЕ/мл) в DPBS (pH 7.4).	7	37	[23]
Метакрилированная гиалуроновая кислота (80 – 100 кДа, «Biosynth», США)	1%, 3%, 5% масс.	Метакрилированный желатин (тип B из бычий кожи, «Sigma Aldrich», США) 2%, 6%, 10% масс. Фотоинициатор – Irgacure 2959 («Sigma Aldrich», США) 0,5% масс.	HAMA (СМ = 11%), GelMA (СМ = 40%) смешивали с Irgacure 2959 и отверждали УФ-излучением (365 нм, 4 Вт/см², 10 мин).	Раствор коллагеназы тип II (0.001% масс.) в PBS (pH = 7.4).	1	37	[19]
Метакрилированная гиалуроновая кислота (2000 кДа, «Kikkoman», Япония)	1% масс.	Метакрилированный желатин (тип B из свиной кожи, «Sigma Aldrich», США) 10% масс. Сшивающий агент – 3-акрилоксипропилсилантриол функционализированный нанокремнеземом 0.1 – 1% масс. Фотоинициатор – фенил-2,4,6-триметилбензоилфосфинат лития (LAP, «Sigma Aldrich»,США) 0.3% масс.	HAMA (СМ = 85 ± 10%), GelMA (СМ = 95 ± 5%) в соотношении 2:1 и сшивающий агент смешивали с LAP. Сшивание проводили с использованием фотореактора с УФ-излучением (280 – 400 нм, 2 мин).	Раствор гиалуронидазы (2.5 МЕ/мл) в PBS (pH 7.4).	30	37	[20]
Тиолированная гиалуроновая кислота (400 кДа, «Blafar», Ирландия)	4% масс.	Гиперразветвленный PEG-DA (10 – 20 кДа, «Sigma Aldrich», Великобритания) 40% масс.	Растворы компонентов в PBS смешивали в соотношении 1:1. Гидрогель образовался в результате реакции акрилатных групп ПЭГ-ДА с тиоловыми группами гиалуроновой кислоты по реакции присоединения Михаэля.	PBS (pH 7.4).	64	37	[22]
Акрилированная гиалуроновая кислота (10 кДа и 50 кДа, «Lifecore Biomedical», США)	0,3 моль/л	Сшивающий агент – полиэтиленгликоль-тетратиол (10 кДа, «Sun Bio», США) 0.03 моль/л	Гелеобразование акрилированной гиалуроновой кислоты и PEG-SH₄ происходило в результате реакции Михаэля при температуре 37°C.	PBS (pH = 7.4).	45	37	[17]
	0,3 моль/л			Раствор гиалуронидазы (100 МЕ/мл) в PBS (pH 7.4).	45	37	[17]